Large culture IPTG 농도

Large culture IPTG 농도

작성일 2024.05.21댓글 1건
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O.D600=0.6~0.8 일 때 IPTG 넣으려고 하는데요

1.3L 짜리 6개 LB 있고 여기에 
final concentration이 1mM IPTG 되도록 하려면

IPTG 몇 mg을 물 ml에 넣어야 하는지 모르겠어서 고민하다 질문 올려요...

IPTG MW는 238.31 입니다.

제 나름대로 계산했을 땐 1858 mg을 30ml 에 넣고 5ml씩 넣어주면 될 거같은데 딱 맞춰서 만드는 것이 아닌 좀 더 남게 만들어야 하는지, 실험실에선 30ml 가 아니라 꼭 15ml 튜브를 이용해야하는 것인지 감이 안 와서요...

랩실 전문가 분들의 도움이 필요합니다ㅠㅠ 부탁드려요



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profile_image 익명 작성일 -

간단하게 생각해봅시다.

IPTG를 처리하는 방법은 많아요.

먼저 1 M의 농도로 IPTG stock을 만들어서 1/1000로 넣으셔도 되고,

아니면 몰농도를 계산하셔서 바로 넣으셔도 상관 없습니다만,

보통 전자를 많이 사용합니다.

후자인 경우

1.3 L LB broth에 0.31 g 넣으면 됩니다.

전자의 경우

으로 계산하시면 되는데

보통 10 ml 정도 만들어서 1 ml씩 분주해서 냉동보관을 해요

이렇게 1 M IPTG가 만들어지면 1.3 ml(1.3 L/1000)을 1.3 L에 넣어주시면 됩니다. (단위 주의해주세요)