S 에 상동 의 다양한 각도에서 여러 사본 의 cDNA시카 게놈 에서 발생합니다.낙인 의 papillar 세포에서 발현S 성적표 는균질 인구 구성하는 나타납니다.
이 결론 은S6 , S13 및 S14 대립 유전자 에 대한 동형 접합체 세 시카 라인의 각각 의정제 된 56 cDNA를 삽입 프로브 (2) 에 교잡 에 의해 격리 오명 S cDNA를 분석 을 기반으로합니다.
이러한 유전자형 의 각각 에 대한 몇 가지 독립적으로 절연 S 의 cDNA를 분석 하였다 . 3 ' 과 5' 에서 각각 350 BP 에 대해 얻은 서열 정보 는이 cDNA를 의 (데이터가 표시되지 않음)에 자신의 신분 을 과시하고 종료합니다. 그것은 낙인 S 성적표 의 주요 수종 은 하나의 유전자에 의해 인코딩 됩니다 때문에 나타납니다.
그러나게놈 라이브러리에서 이 유전자 의 분리 는브라 시카 게놈 (2) 기타 관련 시퀀스의 발생 에 의해 복잡합니다. 이 시퀀스 의 추정 은 NCO I, 그 인식 순서 CXG 부족 하기 때문에 식물의 DNA 의 메틸화 의 높은 수준 구분하지효소로 소화 잎 DNA 남부 분석에 의해 얻어졌다 . 그림 . S22 , S13 , 및 S14 동형 접합자 는 NCO I 사이트 가 부족한흠 번역 된 513- cDNA를 조각 하여 분석 할 때 다중 대역 을 얻을 하는 3 보여줍니다. 강도 의 정도 를 변화 와 함께 몇 가지 11 조각 은 브라 시카 게놈SLSG 구조 유전자 에 관련된 DNA 서열 의약 상응하는 숫자를 포함 하는 제안 이 나타납니다. 복잡한 제한 패턴 브라 가 동형 접합체 모두 지금까지 또한 그림 A. 장대 ( 란츠 ) 에 대한 그림과 같이십자화과 가족의 다른 장군 의 분석 의 대표 입니다. 3 . 이 복잡한 조직 으로 인해, 직접 확인하고낙인 표현 자체 호환성 유전자 사본을 분리 하는 것이 불가능했습니다 . 사실, 게놈 라이브러리는 S- cDNA를 탐침 으로 검사를 하는 경우, 다른 S- 일치하는 시퀀스번호가 격리됩니다. 두 differrent 게놈 라이브러리는 56 S13 동형 접합체 식물의 DNA 에서bacteriophalge벡터 EMBL4 에 건설 및정제 S6 - cDNA를 삽입 프로브 상영되었다 . 22 클론S13 라이브러리 X 105 (10 의 5 승 ) 패 심사 후 5 격리 된 반면,S6 도서관에서 106 재조합 의심사 는 77 교배 파지 의 총 이 나왔고 . 중복
클론 들은 제한 지도에 따라 그룹 으로 파악하고 분류 하였다. 텐 지역 의 cDNA 그러나 그들의 제한 맵에서 다른 과 DNA 의 약 200 킬로바이트 포괄S 에 대한 모든 표시 상동 ,이 방법 ( JBN , 남성 , 게시되지 않은 데이터 ) 에 정의되어 있습니다. 이러한 두 영역의 구조는 그림 에 표시됩니다. 4 제한 지도 에서 관찰 된 차이 를 illlustrate 합니다 . 등으로 sugggested
하이브리드 신호의 다양한 수준 은 동일한 S 유전자형 에서 파생 된 다른 S 관련 사본 은 또한 S 의 cDNA 에 유사성 의 정도 를 변화 보여 브라 DNA ( 그림 3) , 남부 분석 이 관찰 . 예를 들어,S 관련 단편 서열 분석 은 그림 dliagramed . 4 84 % 를 보이고S6 cDNA를 65 %까지 전반적인 동성 이다.
전사 셀프 호환성 유전자는 Intronless 입니다. 오명 용의자 에 expresssed자가 불화 합성 유전자 사본을 분리 하기 위해, 우리는 브라 DNA 남부의 오 에고유 한 시퀀스를 감지S 의 cDNA 에서 특정 제한 조각 을 식별하는 시도했다. 이러한조각 은 S 의 염기 서열 의비교에서 확인되었다
이 cDNA를 인코딩 하지 복제 게놈 S 시퀀스 의 그것과 cDNA를 . 많은 유전자 가족 의 경우 는 ,코딩 영역 에 해당하는 DNA 서열 은5 ' 와 3' 번역되지 않은 지역 보다 훨씬 더 보존 합니다. 따라서, - 13cDNA 의3 ' 비 번역 영역 에서 파생 된조각은 다른 브라 의 유전자형 에 하나의 제한 단편 교배 . 이 3 ' 프로브 는 그림 에 표시됩니다. 3= 3.5 KB 에 교배 하기 = 8 KB, 및 = 6.5 - KB 제한S22 ' S13 의 조각 , 및 S14 동형 접합자 , 각각 . 애기 장대 게놈 은, 다른 한편으로는, 이 유전자 특정 프로브 에는 하이브리드 을 보여줍니다 . 3 ' 프로브는이미 고립 된 게놈 클론 교잡 실험에 사용 하였다. 이 프로브 와 하이브리드S6 게놈 클론 한 S13 클론 없음 . 이 긍정적 인 잡종 S13 게놈 시퀀스의 ID는 cDNA의오명 S13 을 인코딩으로 제한 매핑 및 염기 서열 분석 에 의해 확인 되었다. 이 유전자 의 가장 두드러진 특징 은 그것 의 cDNA 의 와게놈 시퀀스의 제한 지도 ( 그림 5) 와 염기 서열 의 정렬 (미도시) 에 의해 설명된다 . 유전자의 단백질 코딩 영역의 nucles 의 otide 순서 (4)이전에보고 된 S13 의 cDNA 의 염기 서열 로부터 예측 과 동일중단 단백질 서열 을 예측한다.
이 전사 유전자는 일반적으로 진핵 세포 유전자의 측면에서는 지역에서 발견 된 신호 (그림 5 )가 있습니다. 등 여러 가지 식물 유전자 의 경우 , 신호가 3 'TAG 정지 코돈 으로 발견 하나 이상의 폴리 (A )입니다. 의서열 분석
여러 S13 의 cDNA 클론3' - 가장 AATAAA 신호가 사용되는 표시했습니다 . 진핵 합의 " TATA 상자 " 에 perllustrate fect 적합 와TATAAAT 순서는 5 '번역 개시 사이트에서 55 기지 에서 시작하여 코딩 지구에 위치하고 있습니다. 흥미롭게도, 이 puthe 질적 인 TATA 및번역 개시 코돈 사이의 순서는 45 연속 퓨린 의기관 으로 구성되어 있습니다.