세균의 형질전환 효율 계산
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세균을 배양해서 형질전환의 효율을 계산해야 하는데요.
아래의 식으로 형질전환 효율을 구했습니다.
형질전환 효율(CFU/µg) = (배지 위의 CFU 개수/ ng pET28a DNA) * 10^3ng/µg*(형질전환체의 양/배지의 양)*dilution factor(희석된 정도)
위 식은 플라스미드 DNA 1µg당, 형질전환하는 세균의 수 인걸로 알고 있습니다.
같은 농도의 형질전환체가 담긴 LB배지를 가지고 다른 농도만(10배와 100배) 다르게 희석해 고체 배지에 도말하여 콜로니 수를 세고 형질전환의 효율을 구했습니다.
앞에서 말했듯 위 식은 플라스미드 DN A 1µg당, 형질전환하는 세균의 수 이기 때문에, 희석배수가 다르더라도 결국 형질전환 효율 식에서 다시 그만큼을 곱해서 이론적으로는 100배 희석한 배지와 10배 희석한 배지가 같은 값이 나와야 하는 것 아닌가요? (아니면 제가 식을 잘못 이해한걸까요..?)
실제로는 100배 희석한 것과 10배 희석한 배지의 형질전환 효율이 다르게 나타났습니다.
이러한 형질전환 효율의 차이는 어떠한 외부 요인으로부터 나타난건가요?
세균을 배양해서 형질전환의 효율을 계산해야 하는데요.
아래의 식으로 형질전환 효율을 구했습니다.
형질전환 효율(CFU/µg) = (배지 위의 CFU 개수/ ng pET28a DNA) * 10^3ng/µg*(형질전환체의 양/배지의 양)*dilution factor(희석된 정도)
위 식은 플라스미드 DNA 1µg당, 형질전환하는 세균의 수 인걸로 알고 있습니다.
같은 농도의 형질전환체가 담긴 LB배지를 가지고 다른 농도만(10배와 100배) 다르게 희석해 고체 배지에 도말하여 콜로니 수를 세고 형질전환의 효율을 구했습니다.
앞에서 말했듯 위 식은 플라스미드 DN A 1µg당, 형질전환하는 세균의 수 이기 때문에, 희석배수가 다르더라도 결국 형질전환 효율 식에서 다시 그만큼을 곱해서 이론적으로는 100배 희석한 배지와 10배 희석한 배지가 같은 값이 나와야 하는 것 아닌가요? (아니면 제가 식을 잘못 이해한걸까요..?)
실제로는 100배 희석한 것과 10배 희석한 배지의 형질전환 효율이 다르게 나타났습니다.
이러한 형질전환 효율의 차이는 어떠한 외부 요인으로부터 나타난건가요?
#세균의 형질전환 보고서